論文(設計)開題報告：染料分散橙H-4RL對大型蚤的慢性毒性研究

大學本科畢業(yè)論文(設計)開題報告
學院：化工學院　　　　　　　　　　　　　專業(yè)班級：09環(huán)境科學　

課題名稱 染料分散橙H-4RL對大型蚤的慢性毒性研究

1、本課題的的研究背景，目的和意義：大型蚤屬于浮游甲殼類動物，以藻類為食，是魚類和無脊椎捕食動物的餌料，處于水生生態(tài)系統(tǒng)中物質循環(huán)和能量流動的關鍵環(huán)節(jié)，在控制水環(huán)境中起著重要的作用。與其它水生生物比較具有生活周期短、繁殖快、經濟、方便易得、對毒物敏感、易于在實驗室培養(yǎng)等優(yōu)點，因而成為國際上公認的標準試驗生物，廣泛地用于水生生物毒理試驗的研究。有色染料作為一種常見的環(huán)境的污染物，對水生生物的毒性影響是普遍存在的，最近幾年間隨著水環(huán)境污染的加劇，人們越來越多的重視對各種水環(huán)境污染物的研究，但是在研究有色染料對生物體毒性方面的文章還有所欠缺。
本實驗通過研究染料分散橙對大型蚤的慢性毒性作用，具體了解大型蚤對有色染料毒性的耐受范圍，從而了解有色染料對水生生物體的存在的毒性影響。從而為有色染料污染對水環(huán)境整體造成的不利影響提供可參考的資料。

2、 文獻綜述（國內外研究情況及其發(fā)展）：
水環(huán)境污染問題是全球環(huán)境問題中較突出的問題，隨著經濟的飛速
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所見的報道甚多，我國在80年代后陸續(xù)在大型蚤生物測試技術上展開了研究，取得了一定的成果，但是其研究水平比起國際水平還有一定的差距。目前，大型蚤的測試技術已引起了我國研究人員的極大重視，他們己經廣泛的研究了大型蚤的生長、繁殖、富集的慢性毒性試驗，并把這些試驗成果應用于各個領域，初步的發(fā)展了其代謝試驗和測試方法，但是對化學毒物的致畸、致突變性研究未見報道，如果能建立用大型蚤測試環(huán)境化學物質的致突變性等方法，那么它的應用價值將會更大，更有意義。
3、 本課題的主要研究內容（提綱）和成果形式：
一：主要研究內容
(一)：大型蚤的培養(yǎng)及敏感性的測定。
本實驗所用的大型蚤是從中國預防醫(yī)學科學院環(huán)境衛(wèi)生工程研究所提供，通過研究大型蚤及其食物柵藻的培養(yǎng)方法，來篩選出適合本實驗室培養(yǎng)的方法，再對培養(yǎng)出的蚤做敏感性實驗的測定，以確定此大型蚤符合試驗規(guī)定。
(二)：染料分散橙對大型蚤的慢性毒性。
通過設置不同濃度梯度的混有分散橙的培養(yǎng)液來飼養(yǎng)大型蚤，來確定何種濃度下分散橙會對大型蚤的生殖，形態(tài)變化，發(fā)育情況和存活造成影響，從而具體確定分散橙對大型蚤的慢性毒性作用的大小。
二：成果形式
本課題研究的成果以數據、圖表以及機理分析的形式進行表達，數據包括原始數據和計算分析獲得的數據，然后用圖表將關聯的數據形象地表示出來，以便于對整個研究過程進行機理分析與討論。

4、擬解決的關鍵問題：
一：影響大型蚤的存活的因素有很多：光照，溫度，營養(yǎng)物質，培養(yǎng)液的組成等，這些條件有部分在預實驗的時候效果不是很好，大型蚤的成長不是很好，需要關注并且調整試驗條件，以達到最好的試驗效果。
二：慢性毒性試驗比較關鍵的內容是保持實驗的完整性一致性，中間出現的任何意外或失誤都可能導致整個試驗的失敗，所以比較重要的是耐心和觀察，隨時發(fā)現大型蚤的變化，由于經驗不足可能蚤出現異常時未能及時發(fā)現觀察記錄，這點要特別注意，保持試驗時的專注，完成較好的結果

5、 方法和步驟：
按照OECD標準方法[23]進行。試驗在50 ml燒杯中進行，每個燒杯中加6-24h幼蚤一個，每個濃度平行l(wèi)O個。試驗溫度為20-22℃，光強1500±100lu*，光照周期為16h光照：8h黑暗，試驗歷時21天。根據24h-EC50和48h-LC50和慢性的預試驗選擇，分散橙濃度為空白，5µg/L，10µg/L，20µg/L，40µg/L和80µg/L。試驗溶液,每24h更換一次，每天喂一次柵藻液，喂藻密度約為5*10¬¬5個/ml。每天觀察一
次，記錄大型蚤蛻皮、懷卵和所生幼蚤數等情況，同時棄掉幼蚤，試驗結束時測定母蚤體長，并計算盡生殖率(Ro)，內稟生長率(r)。
Ro=∑l*m*
T=∑*l*m*/∑l*m*
r=InRo/T
式中，l*為存活率，m*為每一齡的產仔數，T為世代周期，*為天數。
r是對生存期，存活率和繁殖的綜合求積分，反映毒物協(xié)迫下種群的發(fā)展變化情況。通過21天的數值計算出來的r值和通過整個生命周期估計的r是否一致，主要取決于大型蚤的早期繁殖情況。
6、本課題的進度安排：
2012.2.18~3.01:查閱相關資料文獻,明確研究課題的研究背景及研究意義。
2012.3.02~3.10:制訂初步的實驗方案，準備藥品和儀器，做一下相應的預實驗，熟悉整個實驗流程。
2012.3.11~3.19：在預實驗中找出隨后實驗過程中可能存在的缺點和無法做到的地方，并加以強化。
2012.3.19~5.01:做正式實驗。
2012.5.02~5.16:撰寫論文。
2012.5.17~6.05:修改論文，補充完善，并最終成稿。



7、參考文獻：
[1] Dave G．Effects of waterborne iron on growth，reproduction，survival and haemoglobin in Dophnia magna．Comparative Biochemistry and Physiology,1984，78e(2)：433—438．
[2] Dave G ……（未完，全文共6477字，當前僅顯示2274字，請閱讀下面提示信息。收藏《論文(設計)開題報告：染料分散橙H-4RL對大型蚤的慢性毒性研究》）